МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БЕСПЛОДИЯ МУЖЧИН

УДК  618.2/4-2:618.177

А.Ш. Орадова, А.С. Каракушикова

Казахский Национальный Медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова, Алматы,

Научно-образовательная лаборатория

В последние годы все большее распространение получает исследование поиска биомаркеров социально-значимых заболеваний человека с помощью молекулярно-генетических методов диагностики и прогнозирования бесплодия у мужчин.

Ключевые слова: бесплодие, репродуктивная система.

Введение

Рост заболеваемости органов репродуктивной системы у женщин и мужчин оказывает существенное влияние на состояние репродуктивного здоровья населения и определяет уровень репродуктивных потерь.

Особую значимость в последние годы приобрела проблема инфекционно-воспалительных заболеваний половых органов. Около 60-70 % всех инфекционно-воспалительных заболеваний происходит за счет хламидиоза и гонореи, в 25-60 % случаев причиной является бактериальный вагиноз.  По данным некоторых авторов, на долю идиопатического бесплодия у мужчин приходится до 30% случаев [1,2].

Цель работы – оценить микрофлору эякулята 92 мужчин из бесплодных пар.

Материалы и методы: из образцов эякулята 92 мужчин выделили ДНК с помощью ПЦР в режиме реального времени. Определение генотипа проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) со специфичными праймерами. Анализ продуктов ПЦР амплификации проводили в 2% агарозном геле с окрашиванием бромистым этидием.

Результаты исследований: В результате проведенных исследований 92 мужчин из бесплодных пар было обнаружено, что наиболее часто среди идентифицированных микроорганизмов в эякуляте мужчин регистрировались грибы рода Candida – 100% Enterobacterium spp. – 90,2%, Streptococcusspp. – 84,8%, Staphylococcus spp. – 88,04%, Eubacteriumspp. – 80,4%, Peptostreptococcusspp. – 66,3%. Реже выявлялись Lactobacillus spp. – 16,3%, Apotobium vaginae – 11,0%,а также урогенитальные микоплазмы Mycoplasma (hominis+genitalium) и Ureaplasma (urealiticum+parvum)соответственно в 8,7% и 7,6% случаев.

Факультативные (энтеробактерии, стрептококки и стафилококки) и облигатные (гарднереллы, превотеллы, порфиромонады, эубактерии, фузобактерии, и др.) анаэробы были определены соответственно в 4,4% и 1,1% случаев.

Ассоциации факультативных облигатных анаэробов и грибов рода Candida обнаружены в 81 пробе (88% случаев).

Показатель общей бактериальной массы (ОБМ) эякулята мужчин колебался в значительных пределах от 10 до 10⁷, что позволило подразделить исследуемые образцы на две группы в зависимости от степени обсемененности биотопа.

Обсуждение и заключение: При сопоставлении результатов исследования образцов эякулята 1 и 2-й групп было обнаружено, что только в пробах с высоким показателям общей бактериальной массы (2-я группа) отмечалось наличие облигатных, факультативных анаэробов и урогенитальных микоплазм (Ureaplasma spp. – 8,2%,Mycoplasma spp., – 1,4%), а также Apotobium vaginae был идентифицирован 11,0% случаев. Кроме вагинального апатибиума, в исследуемых образцах эякулята были идентифицированы и другие бактерии-ассоцианты бактериального вагиноза (эубактерии, гарднереллы, фузобактерии, пептострептококки), которые встречались достоверно чаще в семенной жидкости с высоким бактериальным обсеменением. В частности, в образцах эякулята 2-й группы эубактерии встречались в 94,% случаев против 26,3% случаев в 1-й группе (р<0,0001), пептострептококки в 78,1% против 21,1% случаев в 1-й группе (р<0,0001). Обнаружение ассоциантов бактериального вагиноза в эякуляте мужчин указывает на наличие дисбиоза урогенитального тракта супружеской пары. При высокой бактериальной обсемененности эякулята достоверно чаще регистрировались факультативные анаэробы: так, стрептококки были идентифицированы в 91,8% против 57,9% случаев 1-й группе (р<0,0001), стафилококки – в 97,3% против 52,6% случаев в 1-й группе (р<0,0001). Также у мужчин 2-й группы в 1,4 раза чаще выявлялись ассоциации факультативных, облигатных анаэробов и грибов рода Candida (93,2% против 68,4% случаев в 1-й группе, р<0,0001).

Статистически значимых различий в идентификации лактобактерий и энтеробактерий при низкой и высокой обсемененности эякулята обнаружено не было.

Выводы

Таким образом, установлено, что применение ПЦР в режиме реального времени является скрининговым методом, позволяющим установить уровень бактериальной обсеменности эякулята, идентифицировать широкий спектр факультативных и облигатных анаэробных микроорганизмов, которые имеют огромное значение в этиологии инфекционного генеза нарушения фертильности эякулята.