ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ ПРИ ПОЛИПОЗНОМ РИНОСИНУСИТЕ

24 Sep 2013

УДК 616.216.1 – 002:616 – 006.5 – 031.81

 

С.Ф.Кудайбергенова, Н. Ногаев, А.Камалбеков

Казахский национальный медицинский  университет им. С.Асфендиярова

Алматы 2013 г.

 

 

Проведено исследование содержания «атопического» цитокина IL-4   в сыворотке крови, а также его концентраций  в смывах с мазков-отпечатков со слизистой оболочки носовой полости у больных полипозным риносинуситом. Было выявлено повышение содержания IL-4 как  в сыворотке крови, так и  в смывах  с мазков-отпечатков у больных с полипозным риносинуситом. Метод достаточно информативен при  аллергической этиологии полипозного риносинусита.

Ключевые слова: полипозный риносинусит (ПРС),  атопический цитокин IL-4, смывы с мазков-отпечатков со слизистой оболочки носовой полости.

 

Полипозный риносинусит – хроническое воспалительное заболевание слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух, характеризующееся образованием и рецидивирующим ростом полипов, состоящих преимущественно из отечной ткани, инфильтрированной эозинофилами [1].

Международные совещательные комитеты, изданные руководства, монографии подчеркивают полиэтиологичность этого заболевания и сложный патогенез. Появился целый ряд  новых способов диагностики, позволяющих  при правильной и своевременной постановке диагноза  успешно лечить этот недуг [2].

Актуальность работы  связана с  высокой распространенностью полипозного риносинусита, которая   в разных странах мира колеблется. По данным мультицентровых исследований, проведенных по программе ISAAC в 56 странах мира,  этот показатель доходит до 40% (von Mutius E., Weiland S.K., Keil U., 1999). Особую озабоченность вызывает  тот факт,  что  при несвоевременном выявлении  и лечении   полипозный риносинусит  может трансформироваться в более тяжелое заболевание – бронхиальную астму [3].

Цель работы:

1. Изучить состояние иммунного статуса больных с полипозным риносинуситом (содержание субпопуляций Т-лимфоцитов: CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD72+ -лимфоцитов, концентрации  иммуноглобулинов класса  М,  класса G класса A и  класса Е (IgM, IgG, IgA, IgЕ) и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови).

2. Изучить содержание  цитокина IL-4  в сыворотке крови, а также  его концентрации  в смывах с  мазков-отпечатков со слизистой носа при полипозном риносинусите.

Научная  новизна:

Нами доказана атопическая природа полипозного риносинусита с помощью ряда клинико-иммунологических данных. А наиболее информативным из них является повышение  содержания «атопического» цитокина ИЛ-4 в секретах носа.

Самый частый вопрос, который задают лечащие врачи: «Для чего  необходимо изучать уровни цитокинов?». В совокупности с  лабораторными, инструментальными методами обследования, количественное определение уровня IL-4 имеет важное значение при оценке иммунного статуса организма. В крови здоровых людей IL-4 практически не определяется.

Количества цитокинов могут быть использованы в определении дестабилизации клинического  течения широкого круга  заболеваний человека, развитии различных осложнений [4].

Наиболее оптимальным является применение диагностических иммуноферментных тест-систем для оценки цитокинового статуса как на местном, так и на системном уровне при различных патологиях. К тому же иммуноферментные методы высокоспецифичны, просты и быстры в исполнении и  являются существенным дополнением к пониманию патогенеза заболеваний [5]. В настоящее время считается доказанным, что ИЛ-4 является «атопическим» и при атопических  аллергических заболеваниях повышается его уровень. Предполагается, что основная часть ИЛ-4, продуцируется тучными клетками, эозинофилами, базофилами и связана  с клетками шокового органа, в частности, со слизистой оболочкой полости носа.

Для взятия отпечатков с поверхности слизистой оболочки  носа для определения локального ИЛ-4 у больных с  полипозным риносинуситом, также как и при аллергическом рините,  использовали обычную фильтровальную бумагу  размером 1 см ² (отрезанную ножницами), которую прикладывали на предварительно очищенную физиологическим раствором  слизистую оболочку переднего конца нижней носовой раковины. Время аппликации составляло в среднем 15 секунд. После этого пропитанную фильтровальную бумагу полностью с помощью пинцета погружали  в эпендорф с 0,1мл 0,9% раствора натрия хлорида.  Время экспозиции равнялось 1 часу. Затем фильтровальную бумагу удаляли из эпендорфа  пинцетом и пробирку-эпендорф с полученным раствором цитокинов замораживали при температуре минус 35ºС. Перед постановкой анализа исследуемые образцы были извлечены из холодильника и прогреты при температуре 18-25ºС в течение 30 мин. Растворы из флаконов отбирали только одноразовыми индивидуальными наконечниками для пипеток.

Определение локального ИЛ-4  проводилось методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью специального набора фирмы «Вектор-Бест» (Новосибирск).

Принцип метода основан  на твердофазном «сэндвич»-варианте иммуноферментного анализа. Специфическими реагентами набора являются  моноклональные  антитела к IL-4, сорбированные  на поверхности лунок разборного полистирольного  планшета.

После сбора анамнеза приступали к изучению объективного состояния ЛОР-органов 43 пациентам с полипозным риносинуситом. Осмотр ЛОР-органов осуществлялся эндоскопически, неоднократно, как  до оперативного лечения, так и  после операции. Этим пациентам  провели исследование иммунного статуса, в который входит также исследование цитокинового профиля на примере ИЛ-4.

 

Таблица 1 – Лейкоцитарная формула крови у больных ПРС (М ± m)

Показатель	ПРС (n=43)	Контроль (n=22)
Лейкоциты	6,48±0,127	6,1 ± 0,35
Нейтрофилы п/я	3,96±0,159	3,5 ± 0,17
Нейтрофилы с/я	77,46±0,442*	53 ± 1,21
Моноциты	5,76±0,189	5,2 ± 0,09
Эозинофилы	7,49±0,209*	4 ± 1,45
Лимфоциты %	30,32±0,477	30 ± 0,07
Лимфоциты абс.	1,42±0,083	1,2 ± 0,64
(p<0,05)*

 

Возможно, сегментоядерный нейтрофилез характерен для имеющего место воспалительного процесса со стороны ЛОР-органов, а увеличенное количество эозинофилов (почти в 2 раза) свидетельствует  о сенсибилизированности организма больных.

 

Таблица 2 – Показатели иммунного статуса у больных ПРС (М ± m)

Показатель	(n=43)   (%)	Контроль (n=22)
СД-3 Т-лимф.	63,01±0,739	65,8 ± 2,91
СД-4 Т-хелп.	38,40±0,470	39,6 ± 2,10
СД-8 Т-киллеры	31,83±0,515	26,2 ± 2,33
СД-16 NК	17,12 ± 0,26(%)	18,5± 0,54(%)
СД-4/СД-8 (ИРИ)	1,2	1,5
СД-72 В-лимф.	11,9 ± 1,7	10,4 ± 1,7
IgM, г/л	1,69±0,076	0,9±0,1
IgG, г/л	13,24±0,282	9,4±0,1
IgA, г/л	3,0±0,091*	4,8±0,2
IgE, МЕ/мл	469,67±26,271*	60,0 ± 35,5
ЦИК(ед.отн.плотн.)	85,9 ± 6,2 *	30,1 ± 2,7
IL-4 в сыворотке крови, пг/мл, (n=40)	5,4 ± 0,7 *	1,2 ± 0,5
IL-4 в секр., пг/мл, (n=23)	6,1 ±1,5 *	Отсутствует
Спонтанный НСТ-тест	18,91±0,469	23,73±0,510
Индуцированный НСТ-тест	50,41±3,234	45,65±1,043
(p<0,05)*

 

Как видно из таблицы  резких изменений в содержании иммунокомпетентных клеток не наблюдалось. По-видимому, это связано с длительностью хронического воспалительного процесса. При этом наблюдается незначительное снижение содержания IgA в сыворотке крови. Причем, содержание IgE у них же повышено в 4,5 раза (p<0,05). Также было отмечено  повышение уровней ЦИК почти в 3 раза (p<0,05). По-видимому, причиной этому служит присоединение  бактериальных инфекций при полипозном риносинусите.

В результате проведенного исследования было выявлено повышение содержания IL-4 как  в сыворотке крови, так и  в смывах  с мазков-отпечатков у больных с полипозным риносинуситом.

Повышение содержания  концентрации IL-4 в  сыворотке крови  указывает на наличие атопического механизма гиперчувствительности.  Увеличение  концентрации IL-4 в секретах со слизистой носа также указывает на гиперреактивность со стороны Тh-2.

Таким образом,  ИФА локального ИЛ-4  является не только физиологичным методом исследования, но и достаточно информативным  при оценке и диагностике различных форм полипозного риносинусита (ПРС). Кроме этого дает возможность оценить характер гиперчувствительности  при  аллергической этиологии ПРС.

 

 

 

 

Список литературы

1  Овчинников А.Ю. Место, значение и роль воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости носа и околоносовых пазух в возникновении, течении и лечении сочетанной патологии верхних и нижних дыхательных путей. : Дис… д-р.мед.наук..-Медицина и здравоохранение.-  76.02.2006.0458-С.110.

2  Кудайбергенова С.Ф., Жайсакова Д.Е., Рамазанова Б.А., Ланкина М.В. Способ диагностики аллергического ринита: заявка № 5296  о выдаче инновац. патента РК на изобретение (№ гос. регистрации 2010 / 0332.1 от 30.03.2010).

3  von Mutius E., Weiland S.K., Keil U. Die Internationale Studie zu Asthma und Allergien im Kindesalter (ISAAC): Forschungsstrategie, Methoden und Ausblick // Allergologie.– 1999.– 22, № 5.– С. 275–282.

4  Кудайбергенова С.Ф. Диагностическая ценность исследования уровней ИЛ-4 при  аллергических ринитах // Здоровье и болезнь, 2009.- № 9.- С.103-105.

5  Мокроносова М.А., Давудов Х.Ш., Смольникова Е.В., Мусалова Н.М. ИЛ-4 и ИЛ-8 у больных аллергическим и инфекционным ринитами // Рос. оториноларингол.– 2005, № 6.– С. 33–35.

 

 

С.Ф. Құдайбергенова, Н.А. Ноғаев, А. Камалбеков

Полипозды риносинусит кезіндегі цитокинді профиль

 

Полипозды риносинуситі бар науқастардан мұрын қуысының шырышты қабатының жағындысынан және қан құрамынан  «атопиялық»  цитокин

IL-4  зерттедік. Зерттеу барысында науқастарымыздан IL-4 мұрын қуысының шырышты қабатының жағындысында және қан құрамында  мөлшерінің көбейгенін анықтадық. Бұл тәсіл полипозды риносинуситтің аллергиялық этиологиясын түсінуде көп мәлеметтер  береді.

 

S.F. Кudaybergenova, N.A. Nogayev , A. Kamalbekov

The cytokine profile in polypoid rhinosinusitis

 

Resume: A study of the content of «atopic» cytokine IL-4 in serum, as well as its concentration in the lavage with smears from the mucous membrane of the nasal cavity in patients with polyposis rhinosinusitis. It was revealed elevated levels of IL-4 in the serum and in washings smears polyposis patients with rhinosinusitis. The method is fairly informative in allergic etiology polypoid rhinosinusitis.

 

 

 

 

ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ ПРИ ПОЛИПОЗНОМ РИНОСИНУСИТЕ